Esto se hace por medio de un análisis y descripción de las características del hongo obtenido. Para esta última se realiza una observación microscópica de sus estructuras, es necesario realizar una tinción o coloración, siendo el procedimiento el siguiente:
1. Sembrar el hongo en una placa con medio de cultivo PDA.
2. Esperar el crecimiento por espacio de 15 días.
3. En una lámina portaobjetos, colocar una gota de azul de lactofenol u otra solución.
Azul de lactofenol (azul de algodón)
Ácido láctico 25 ml
Glicerina 50 ml
Agua destilada 25 ml
Azul de algodón 0.05 g
4. Con una aguja entomológica No. 000 ó con un alfiler minutum, tomar una pequeña muestra del tejido hifal y dispersarla en un portaobjetos sobre una gota del colorante y colocarle un cubreobjeto.
5. También se puede tocar levemente la superficie de una colonia en desarrollo con una cinta adhesiva transparente y pegarla sobre una lámina portaobjetos.
6. Observar al microscopio plano con aceite de inmersión, cuando las estructuras son muy pequeñas.
7. Medir la longitud y el diámetro de cualquier estructura de interés de acuerdo a la especie que se está observando.
Este método permite ver las estructuras sin que pierda su disposición natural y sin perturbar mucho su morfología.
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS MÁS IMPORTANTES DE
Beauveria bassiana
Colonia: la colonia en PDA a los 14 días es algodonosa a polvorienta, blanca.
A medida que va pasando el tiempo se vuelve amarillenta, cremosa. El revés es de color rojizo al centro y amarillento alrededor.
Conidióforos: de 1-2 de diámetro donde nacen células conidiógenas en grupos grandes.
Células conidiógenas (c.cs.): están agrupadas formando grupos compactos grandes y a veces solitarias, en forma de botellitas de 3 a 6 x 3 a 5μ. En ciertos casos, las c.cs. se ramifican formando c.cs secundarias. Al final de las c.cs se forma un raquis que sostiene las conidias.
Raquis: hasta de 20μ de longitud y 1μ de diámetro, denticulado, que sostiene una conidia en cada dentícula.
Conidias: hialinas, globosas a subglobosas, de 2 a 3 x 2 a 2.3μ que se insertan sucesivamente en el raquis en forma opuesta
Por otra parte las formulaciones en aceite aumentan la adhesión de la espora en la cutícula del insecto atraves de interacciones hidrofobicas entre la espora y la superficie de la cutícula, mejoran la infección en bajas humedades, no se evaporan, protegen las esporas del hongo sobre una rápida desecación y luz UV.
No hay comentarios:
Publicar un comentario